甲基化RNA 免疫共沉淀基于抗体(m6A) 与甲基化修饰碱基的特异性结合。包被有磁珠的抗体用于结合修饰的RNA。通过免疫结合吸附,纯化产物富含甲基化修饰片段。后续通过高通量测序,可以研究整个转录组中的甲基化RNA区域,可以是lncRNA、mRNA、circRNA等。
2、技术流程
细胞样品中m6A RNA 表达的测定(斑点印迹法)
细胞裂解获得总RNA样品
M6a 抗体IP 沉淀并与磁珠结合,共价形成复合物。
洗脱纯化得到甲基化修饰的RNA产物
高通量测序
生物信息学分析
3、技术应用
mRNA修饰
转录水平的调控
转录和翻译过程之间的联系
4、应用案例
m6A mRNA甲基化调控CTNNB1促进肝母细胞瘤增殖
作者选择肝母细胞瘤模型,在细胞水平上研究m6A甲基化修饰和m6A因子上调对肝癌HB细胞生长、增殖和凋亡的影响。作者发现METTL3 在HB 细胞中作为预后因素发挥着关键作用。调节作用,进而在动物水平上建立NC组和shRNA敲低组,观察肿瘤形成的大小,阐明METTLL3在肿瘤的发生、发展中起着重要的调节作用。在阐明表型后,我们进一步在表观遗传水平上研究分子机制。利用m6a-Seq和生物信息学分析找到METTL-3与CTNNB1结合的靶点。
客户提供:
仅来自人类、大鼠和小鼠物种的样本,包括核组织;
细胞,数量1-3x107;
组织,需要10-30 毫克。
辉园阁提供:
m6a甲基化RIP实验的抗体;
斑点印迹检测背景甲基化修饰的RNA 水平;
MeRIP免疫共沉淀实验;
高通量测序和生物信息学个性化分析;
完整的实验报告和原始数据结果。
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1.RNA去甲基化酶ALKBH5通过m6A-YTHDF2依赖性方式转录后激活PER1来预防胰腺癌进展;
2.m6A依赖性糖酵解促进结直肠癌进展;
3.METTL14介导的SOX4 mRNA N6-甲基腺苷修饰抑制结直肠癌肿瘤转移;
4. METTL3启动的m6A mRNA甲基化直接促进YAP翻译,通过调节MALAT1-miR-1914-3p-YAP轴增加YAP活性,诱导NSCLC耐药和
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用户评论
我在读基因表达的研究文献,这个MeRIP技术听起来挺 interesting!
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表观转录组调控啊,这概念太抽象了,不过这个m6A甲基化修饰听着就很有内涵
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感觉这种meRIP研究能帮助我们更深入了解基因表达的复杂机制
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有点想学习一下关于meRIP技术的原理,看起来很厉害的样子!
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RNA甲基化修饰?这也太让人惊奇了!这新技术能带来哪些突破呢?
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现在基因测序技术发展日新月异啊,这个MeRIP也是一个非常前沿的研究方向
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表观遗传学越来越热了,看来未来这方面的研究会越发明新思路
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m6A甲基化修饰和基因表达的关系是怎么样的呢? 期待有更详细的解释!
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这种技术会不会在临床医学领域有所应用呢?真是让人期待!
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我想查阅一些关于MeRIP应用实例的研究文章,看看它能解决哪些实际问题
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这篇文章的标题很有吸引力,让我更想去深入了解MeRIP的原理及运用场景
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研究基因表达机制总是让人感到兴奋,期待这个MeRIP技术能给我们带来更多启发!
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表观转录组调控真是一个充满未知的领域啊,这种meRIP研究是探索其中的新航线!
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这个研究方向听起来非常复杂,但也让我对基因学的研究更加好奇了
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我希望未来更多科学家能投入到MeRIP相关的研究中,取得更大的突破!
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感觉MeRIP技术应该有很多应用潜力,不仅仅局限于学术研究领域
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通过学习meRIP,我或许可以更好地理解一些遗传疾病的成因 !
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表观转录组调控和药物研发之间会不会存在关联?
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这种MeRIP技术应用的前景似乎十分广阔!
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